حيوانات آزمايشگاهي :
در اين تحقيق از رتهاي سفيد نژادwistar استفاده شد . اين حيوانات در سن
3 ماهگي و وزن تقريبي 250 تا 300 گرم از موسسه ي سرم سازي رازي مشهد تهيه شدند . تعداد حيوانات استفاده شده در اين تحقيق 48 عدد رت نر بود كه در 8 گروه
6 تايي به صورت زير تقسيم شدند . البته در طول تحقيق يكي از رت ها از بين رفت و كار با 47 رت ادامه يافت كه شامل يك گروه 5 تايي و هفت گروه 6 تايي بودند .
1- گروه كنترل : سالم و دست نخورده
2- گروه شم : ايجاد ضايعه ي كمپرسيون عصب سياتيك در پاي چپ و تجويز سرم فيزيولوژيك
3- گروه تجربي 1 : ايجاد ضايعه ي كمپرسيون عصب سياتيك پاي چپ و سه بار تزريق محلول سيليكات سديم
4- گروه تجربي 2 : ايجاد ضايعه ي كمپرسيون و سه بار تزريق عصاره ي گياه دم اسب.
5-گروه تجربي 3 : ايجاد ضايعه ي كمپرسيون عصب سياتيك پاي چپ و شش بار تزريق محلول سيليكات سديم
6- گروه تجربي 4 : ايجاد ضايعه ي كمپرسيون عصب سياتيك پاي چپ و شش بار تزريق عصاره ي گياه دم اسب
7- گروه تجربي 5 : ايجاد ضايعه ي كمپرسيون عصب سياتيك پاي چپ و نه بار تزريق محلول سيليكات سديم
8- گروه تجربي6: ايجاد ضايعه ي كمپرسيون عصب سياتيك پاي چپ و نه بار تزريق عصاره ي گياه دم اسب
جمع آوري گياه دم اسب و نحوه ي عصاره گيري آن :
گياه دم اسب مورد استفاده از اين تحقيق از منطقه سياهرود گرگان جمع آوري و ساقه ها و برگهاي گياه جدا و پس از خشك شدن به صورت پودر درآورده شدند . چون در طب سنتي براي تامين اثرات ترميمي آن در انسان روزانه شش كپسول360 ميلي گرمي از پودر گياه دم اسب توصيه شده است مقدار مورد نياز روزانه براي يك رت 300 گرمي برابر 96/12 محاسبه شد و چون تزريقات هر سه روز يكبار انجام مي شد مقدار لازم براي اين مدت 88/38 محاسبه شد .
مقدار پودر لازم براي انسان در هر روز : 360 × 6 = 2160 ميلي گرم
مقدار پودر لازم براي رت 300 گرمي : 96/12 ميلي گرم
مقدار پودر لازم براي سه شبانه روز : 96/12 × 3 = 88/38
به طور قرار دادي ميزان تزريق محلول به هر رت 300 گرمي يك سي سي در نظر گرفته شد و چون رتهاي دريافت كننده در اين تحقيق به سه گروه شش تايي تفكيك شده بودند كه گروه اول سه بار ، گروه دوم شش بار و گروه سوم نه بار عصاره ي گياه دم اسب دريافت كردند . از اين رو حجم لازم از عصاره ي گياه دم اسب 108سي سي محاسبه شد.
سي سي 108 = (3 × 6) + (6×6) + (9×6)
جهت احتياط حجم لازم عصاره 130 سي سي در نظر گرفته شد و ميزان لازم از پودر ساقه ي دم اسب براي تهيه ي 130 سي سي عصاره 054/5 ميلي گرم محاسبه شد . چون براي تهيه ي هر يك سي سي مقدار 88/38 ميلي گرم پودر مورد نياز است .
گرم 054/5 = 5054= 88/38 × 130
براي عصاره گيري از برگ و ساقه 5 گرم از هر يك از پودرها در 350 سي سي آب مقطر ريخته شد و روي حرارت قرار گرفت بعد از اين كه محلول خوب جوشيد و كمي غليظ شد آنرا به صورت كاغذ صافي ، صاف كرده و با افزودن آب مقطر حجم محلول زير كاغذ صافي به 130 سي سي رسانده شد .
سپس pH عصاره به كمك دستگاه pH متر اندازه گيري شد . گياه دم اسب به علت وجود تركيبات اسيدي مختلف داراي ماهيت اسيدي است كه مقدار آن با دستگاه
pH متر 66/4 اندازه گيري شد و براي خنثي سازي pH اسيدي عصاره از سود نرمال استفاده شد . يعني محلول سود به صورت قطره قطره استفاده گرديد تا pH به 4/7 برسد .
پس از تهيه ي عصاره ي برگ و ساقه ي دم اسب ميزان تركيبات سيليس موجود در عصاره ها به كمك دستگاه اسپكترومتري جذب اتمي (در شعله ي استيلن و اكسيد نيترو C2 H2 , N2O) در آزمايشگاه شيمي تجزيه اندازه گيري شد